双萤光素酶报告基因检测（Dual-Luciferase Reporter Assay）是先以萤光素(luciferin)为底物来检测萤火虫萤光素酶(Firefly luciferase)，后以肠腔素(coelenterazine)为底物来检测海肾萤光素酶(Renilla luciferase)，并且在后续加入海肾萤光素酶底物时，同时加入抑制萤火虫萤光素酶催化luciferin发光的物质，该物质可以淬灭约99.9%以上的萤火虫萤光素酶信号，使后续检测仅仅检测到海肾萤光素酶的活性，从而实现双萤光素酶报告基因检测。

通常把感兴趣基因的转录调控元件或5'启动子区克隆在luciferase的上游，或把3'UTR区克隆在luciferase的下游等，构建成报告基因(reporter gene)质粒。然后转染细胞，用适当药物等处理细胞后裂解细胞，测定萤光素酶活性。通过萤光素酶活性的高低来判断药物处理等对目的基因的转录调控作用。Renilla luciferase相对更多地被用作转染效率的内参，以消除细胞数量和转染效率的差异。

双萤光素酶报告基因检测技术服务流程

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